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白介素elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)測(cè)定方法與注意事項(xiàng)
  • 發(fā)布日期:2021-08-18      瀏覽次數(shù):3219
    • 白介素elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)測(cè)定方法:

      1、定性測(cè)定

      (1)陽(yáng)性判定值法(cut-off value,CO值):一般為陰性對(duì)照的平均A值加一個(gè)常數(shù),試劑制備嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)化,要先計(jì)算出陽(yáng)性對(duì)照A值平均數(shù)和陰性對(duì)照A值平均數(shù)。標(biāo)本A值≥CO值即為陽(yáng)性。
      (2)抑制率法:在競(jìng)爭(zhēng)抑制法中結(jié)果可用抑制率表示。
      抑制率(%)=(A陰性對(duì)照A- A待測(cè))/陰性對(duì)照X100%,一般以抑制率≥50%為陽(yáng)性
      2、半定量測(cè)定  
      結(jié)果一般以滴度表示。將標(biāo)本連續(xù)稀釋后,進(jìn)行ELISA檢測(cè),在陽(yáng)性臨界值以上的zui高稀釋度即為該標(biāo)本的“滴度"。
      3、定量測(cè)定  
      即用己知量的標(biāo)準(zhǔn)品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測(cè)定,與待測(cè)標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行測(cè)定,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,結(jié)果以絕對(duì)量或活性單位表示。

      二、注意事項(xiàng):

      1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

      2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

      3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最hao控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,使用排槍加樣。

      4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最hao做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

      5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

      6.底物請(qǐng)避光保存。

      7.嚴(yán)格按照小鼠卵泡抑素樣蛋白3(FSTL3) ELISA試劑盒說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

      8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

      9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

      10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。

       


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